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원장칼럼

제목 HER2수용체 과발현 검사 - 제자리부합법 2023-07-28

https://blog.naver.com/gogngs/223168434673 

 

 

 

제자리부합법은 HER2/neu 유전자 증폭 정도를 측정하는 방법이다. 

 

형광제자리부합법(fluorescent in situ hybridization; FISH)이 가장 널리 쓰이는 검사법이다.

 

 

HER2/neu 유전자 증폭과 HER2 단백 발현이 깊은 연관성을 보이기 때문에 HER2 단백 발현과 마찬가지로 유전자 증폭이 관찰될 경우 불량한 종양 특성을 보인다. 핵분화도가 나쁘며, ER, PR 발현이 낮고 낮은 생존율과 높은 재발률을 보인다. 

 

 

현재 쓰이는 FISH 법은 이중 탐색 (dual probe) 법을 사용하는데 이는 HER2/neu 유전자에 특이적인 형광탐색자와 17번 염색체 동원체 특정산출 형광탐색자 ( chromosome 17 centromere-specific enumeration probe ;CEP) 의 2가지 형광탐색자를 이용하여 HER2/neu 유전자 증폭정도와 CEP 신호를 비교하는 방법이다. 

 

 

FISH 검사법은 단백질의 과발현을 검색하는 것에 비해 DNA의 상대적 안정성을 고려할 때 더 정확한 방법이다. 

 

 

2007년 ASCO CAP 권고안에서는 HER2/neu signal 과 CEP signal 비율이 2.2를 넘느 경우 양성, 1.8 미만인 경우 음성으로 판단하였으며 CEP가 탐지되지 않거나 단일 탐색자를 사용하는 경우 HER2/neu 유전자 신호가 핵당 6개 이상인 경우 양성 , 4개 미만인 경우 음성으로 판단하도록 권고하였다. 

 

2013년 권고안에서는 기준을 완화하여 HER2/neu signal 과 CEP signal 비율이 2.0을 넘는 경우 양성으로 판단하도록 개정하였다. 

 

 

염색체제자리부합법(chromogenic in situ hybridization ; CISH)은 형광물질대신  digoxin을 이용하여 HER2/neu 유전자 과발현을 검색하는 방법으로 FISH법에 비해 몇가지 장점이 있다. 

 

 

CISH법은 감산 탐색법(subtractive probe technology)를 이용하기 때문에 반복 DNA 염기서열분석(repetitive DNA sequencing)을 통해 비특이적 부합물을 제거할 수 있다. 

 

또한 시간이 지나면 사라지는 형광탐색자와 달리 영구적으로 보존할 수 있으며, 형광현미경이 아닌 광학현미경으로 검사를 진행할 수 있다. 

 

 

그러나 CISH 법은 개개의 유전자 변화 숫자를 파악하지 못하고 HER2/neu 유전자와 반응시 다량으로 응집된 탐색자만 관찰할 수 있다. 

 

 

은증강제자리부합법(silver enhanced in situ hybridization ; SISH)은 입자를 이용하여 유전자 증폭을 검사하는 방법으로 FISH나 CISH에 비해 더 적은 종류의 시약을 사용할 수 있으며 영구적으로 보관할 수 있고, 일반 광학현미경으로 감사할 수 있는 장점이 있다.